第五節(jié) 人工制備抗體

　　(一)多克隆抗體(pAb)是用Ag(含有多種epitopes)免疫動(dòng)物后，從其血清中提取的Ab。為多種Ab的混合物，故名。

　　獲得pAb的主要途徑有：動(dòng)物免疫血清，恢復(fù)期病人，免疫接種人群

　　pAb的優(yōu)勢是：⑴作用全面(中和、調(diào)理、補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用等，在體外容易容易出現(xiàn)凝集和沉淀反應(yīng)。)

　　⑵來源廣泛，容易制備

　　pAb的缺點(diǎn)是：⑴特異性不高，易發(fā)生交叉反應(yīng)

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　　(二)單克隆抗體(mAb)是由一個(gè)B細(xì)胞雜交瘤克隆合成和分泌的抗單一抗原表位的特異性Ab。

　　1975年Kohler和Milstein采用細(xì)胞融合技術(shù)使可產(chǎn)生特異性抗體的免疫小鼠脾臟B細(xì)胞與長壽的小鼠惡性骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出可產(chǎn)生Ab的雜交瘤細(xì)胞并克隆化制成。

　　mAb的Ag結(jié)合部位和同種型都相同。因此具有下優(yōu)點(diǎn)：①結(jié)構(gòu)均一、純度高;②特異性強(qiáng);③交叉反應(yīng)少;④效價(jià)高(即Ab濃度高);

　　⑤制備成本低，可大量生產(chǎn)。在疾病的預(yù)防、診斷和治療上有廣泛的用途。

　　缺點(diǎn)是：①對人具有較強(qiáng)的免疫原性;②體外抗原抗體結(jié)合試驗(yàn)不易出現(xiàn)可見反應(yīng)。

　　(三)基因工程抗體：是即可保持mAb的均一性、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，又能克服鼠源性的弊端的新型Ab。

　　基本思路是將部分或全部人源抗體的編碼基因，克隆到真核或原核表達(dá)系統(tǒng)中，體外表達(dá)嵌合抗體或人源化Ab;或培育出剔除自身抗體編碼基因，又敲入人Ig基因的小鼠等動(dòng)物，通過抗原免疫，再用該動(dòng)物的脾B細(xì)胞與人骨髓瘤細(xì)胞融合，即可產(chǎn)生完全人mAb。

　　1.人-鼠嵌合Ab V區(qū)是鼠源的，C區(qū)是人源的 Ab。

　　2.人源化Ab

　　3.雙特異性Ab

　　4.小分子Ab

　　目前，基因工程抗體已成功應(yīng)用于臨床上，治療腫瘤及自身免疫性疾病。

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