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2014檢驗(yàn)技師檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識講解:純淋巴細(xì)胞群采集

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  通常利用單核細(xì)胞在37℃和Ca2+存在條件下,能主動(dòng)粘附在玻璃、塑料、尼龍毛、棉花纖維或葡聚糖凝膠的特性,據(jù)此建立許多從單個(gè)核細(xì)胞懸液中去除單核細(xì)胞的方法,藉以獲得高純度的淋巴細(xì)胞群。

  (一)粘附貼壁法

  將已制備的單個(gè)核細(xì)胞懸液傾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中,移至37℃溫箱靜置1h左右,單核細(xì)胞和粒細(xì)胞均貼于平皿壁上,而未貼壁的非粘附細(xì)胞幾乎為純淋巴細(xì)胞,繼用橡皮刮下貼壁的細(xì)胞即為純單核細(xì)胞群。因B細(xì)胞也有貼壁現(xiàn)象,用本法分離的淋巴細(xì)胞群中B細(xì)胞有所損失。

  (二)吸附柱過濾法

  將單個(gè)核細(xì)胞懸液注入裝有玻璃纖維或葡聚糖凝膠SephadexG10的柱層中,凡有粘附能力的細(xì)胞絕大部分被吸附而粘滯在柱層中,從柱上洗脫下來的細(xì)胞主要是淋巴細(xì)胞。此法簡單易行,對細(xì)胞極少損害。

  (三)磁鐵吸引法

  利用單核細(xì)胞具有吞噬的特性,在單個(gè)核細(xì)胞懸液中加直徑為3μm的羰基鐵顆粒,置37℃溫箱內(nèi)短時(shí)旋轉(zhuǎn)搖動(dòng),待單核細(xì)胞充分吞噬羰基鐵顆粒后,用磁鐵將細(xì)胞吸至管底,上層液中含較純的淋巴細(xì)胞。

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